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Análisis de Células Natural Killer (NK) mediante Citometría de Flujo: Función, Aislamiento y Relevancia Clínica

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Análisis de Células Natural Killer (NK) mediante Citometría de Flujo: Función, Aislamiento y Relevancia Clínica

Las células natural killer (NK) representan uno de los tres grupos de linfocitos, aparte de las células T y B. A diferencia de ellos, pertenecen al sistema inmunitario innato y forman parte de la primera línea de defensa frente a un amplio rango de patógenos. De manera sencilla, su función es destruir células; ya sean células infectadas por algún patógeno, o células cancerígenas potencialmente dañinas para el organismo.

La función dual de las células NK

Las células NK, de forma natural en el organismo, están programadas para detectar y matar a las células infectadas o cancerígenas, que expresan ciertos marcadores de malignidad, y para “perdonar” de la muerte a las células sanas del organismo, que no expresan dichos marcadores. 

Sin embargo, existen alteraciones, como las mutaciones, que pueden ocasionar que estas células NK no sean capaces de discernir entre las células sanas y las células malignas, y que por el contrario se dediquen a “matar” a todas ellas por igual, ocasionando una enfermedad autoinmune grave (aquella en la que el organismo se ataca a sí mismo).

Protocolo de análisis

Para analizar el perfil de las células NK se siguen los siguientes pasos:

  1. Aislamiento de PBMCs
  • Recoger unos 4mL de sangre humana y diluirla 1:1 con suero
  • Añadir 4mL de medio de separación
  • Centrifugar a 650xG durante 24 min, y observar que se forman fases. Recoger la fina capa del medio, que se corresponde con las PBMCs, entre las que están las células NK, y depositarla en un tubo nuevo con suero.
  • Repetir el proceso anterior. 
  • Aislar las células NK, añadiendo a la mezcla FBS y medio de separación, y centrifugando a 1200xG durante 10 min. Descartar el sobrenadante y resuspender el sedimento en suero. 
  1. Utilizar los marcadores específicos para células NK y visualizar por citometría de flujo. 

Para llevar a cabo el proceso de centrifugación, los equipos Digicen 22 y Unicen 21 son ideales debido a sus características avanzadas y su versatilidad. La Digicen 22 ofrece un control digital de velocidad y tiempo, lo que permite ajustar fuerzas centrífugas específicas con alta reproducibilidad. Además, cuenta con el sistema REI System (Rotor Easy to Install), que facilita un intercambio rápido y sencillo de rotores. Por otro lado, la Unicen 21, con su diseño compacto y robusto, es una excelente opción para laboratorios que priorizan la eficiencia y la facilidad de uso.

Así, determinar el perfil de toxicidad de las células NK en el contexto de las enfermedades autoinmunes resulta de gran importancia a la hora de pautar una línea de tratamiento, y ello es posible gracias al protocolo anteriormente descrito, en el que la centrifugación tiene gran importancia.

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