Los plásmidos son moléculas de ADN extracromosómico que se encuentran de forma natural en bacterias y arqueas. En el contexto de la ingeniería genética, se emplean como vectores de clonación debido a su capacidad para replicarse de forma independiente al genoma principal de la célula. Esta propiedad permite introducir plásmidos in vitro en distintas células, generando copias de genes específicos que las células podrán expresar posteriormente.

La aplicación de plásmidos ha demostrado ser una herramienta eficaz en investigaciones biomédicas, desarrollo de fármacos y mejora de cultivos en la industria agraria. En estos procesos, la extracción del ADN plasmídico es el primer paso esencial para su manipulación y análisis posterior.

Extracción de ADN plasmídico

Para aislar el ADN plasmídico de su célula hospedadora, se sigue un protocolo compuesto por varias etapas secuenciales:

1. Lisis celular: Las células se incuban con un buffer de lisis durante toda la noche. Este paso permite romper la pared celular bacteriana, liberando su contenido intracelular.
2. Lavados iniciales: Se realizan centrifugaciones a 2.500 xg durante 10 minutos, utilizando una microcentrífuga. Se descarta el sobrenadante y el sedimento resultante contiene los plásmidos de interés.
3. Tratamientos sucesivos: El sedimento se somete a una serie de incubaciones con reactivos como soluciones enzimáticas, SDS, isopropanol y fenol/cloroformo. Estas etapas se alternan con centrifugaciones a 18.500 xg durante 15 minutos para separar el ADN (cromosómico y plasmídico) de otros componentes celulares.
4. Aislamiento específico: Se emplean beads magnéticas u otros métodos seleccionados para purificar el ADN plasmídico.
5. Almacenamiento: Finalmente, el ADN plasmídico se resuspende en una solución de almacenamiento y se conserva a 4 °C para su uso posterior.

La microcentrífuga Biocen 22 es especialmente adecuada para este tipo de aplicaciones, ya que permite trabajar con una amplia gama de velocidades y ofrece la versatilidad necesaria para las diferentes fases del protocolo.

Relevancia del ADN plasmídico en la producción biotecnológica

El empleo de plásmidos en la clonación celular ha revolucionado la medicina en su totalidad, permitiendo la obtención de grandes cantidades de principios activos de medicamentos a través de la modificación genética de las células productoras. Es por ello que el empleo de un protocolo adecuado y de las correctas herramientas para llevarlo a cabo, como las centrífugas, recibe tanta importancia y se encuentra a la orden del día en la mayoría de los laboratorios destinados a tal fin.